第三章 灭菌制剂与无菌制剂
第一节 灭菌法
(一)概述
灭菌法概念：是杀灭或除去所有微生物的繁殖体和芽胞的技术。
微生物包括细菌、真菌、病毒等。细菌的芽胞具有较强的抗热能力，因此灭菌效果，常以杀灭芽胞为准。
灭菌：是指用物理或化学方法将所有致病和非致病的微生物以及细菌的芽胞全部杀灭。
无菌：指在任一指定物体、介质或环境中，不得存在任何活的微生物。
无菌操作法：指在整个操作过程中利用或控制一定条件，使产品避免被微生物污染的一种操作方法或技术。
灭菌制剂(熟练掌握)：指采用某一物理、化学方法杀灭或除去所有活的微生物繁殖体和芽孢的一类药物制剂。
无菌制剂(熟练掌握)：指采用某一无菌操作方法或技术制备的不含任何活的微生物繁殖体和芽孢的一类药物制剂。
无菌制剂种类(熟练掌握)：注射用制剂，如注射剂、输液、注射粉针等;眼用制剂，如滴眼剂、眼用膜剂、软膏剂和凝胶剂等;植入型制剂，如植入片等;创面用制剂，如溃痒、烧伤及外伤用溶液、软膏剂和气雾剂等，手术用制剂，如止血海绵剂等。
防腐：是指低温或化学药品防止和抑制微生物生长繁殖。
消毒：是指用物理化学方法将病原微生物杀死。
药剂学中灭菌措施的基本目的(掌握)：既要除去或杀灭微生物，又要保证药物的稳定性、治疗作用及用药安全。
灭菌制剂与无菌制剂
二、内容讲解
灭菌法分为三大类：物理灭菌法、化学灭菌法、无菌操作法。
(二)物理灭菌法(熟练掌握)
干热灭菌法
(1)火焰灭菌法：直接在火焰中烧灼，适用于耐火焰材质，不适用于药品。
(2)干热空气灭菌法：在高温干热空气中灭菌的方法。干热空气灭菌的条件药典规定135～145℃需3至5小时;160℃～170℃需2小时至4小时，180℃～200℃需0.5至1小时;热原经250℃需30分钟，或200℃以上45分钟，可遭破坏。
此法适用于耐高温的玻璃制品、金属制品以及不允许湿气穿透的油脂类和耐高温的粉末化学药品等。本法缺点是穿透力弱，温度不易均匀，而且灭菌温度较高，灭菌时间较长，不适于橡胶、塑料及大部分药品。
例：可以选用干热灭菌法的是
A、 抗生素
B、 塑料容器
C、 玻璃容器
D、 橡胶塞
E、 蛋白多肽类药物
答案：C
2、湿热灭菌法
湿热灭菌法，是在饱和蒸气或沸水或流通蒸气中加热杀灭微生物的方法。
由于蒸气潜热大，穿透力强，容易使蛋白变性，同时还有作用可靠，操作简便等优点，所以是制剂生产中应用最广泛的一种灭菌方法。是药物制剂生产过程中最常用的方法。可分为：热压灭菌法、流通蒸汽灭菌法、煮沸灭菌法和低温间歇灭菌法。
热压灭菌法
本法一般公认为最可靠的湿热灭菌法。应用大于常压的饱和水蒸气加热杀灭微生物的方法，能杀灭所有细菌增殖体和芽胞。热压灭菌所需的温度及与温度相当的压力及时间如下115℃(67kpa),30分钟;121℃(97kpa)，20分钟;126℃(139 kpa)15分钟。
影响湿热灭菌的因素：
①微生物的种类与数量 耐热耐压次序为：芽孢﹥繁殖体﹥衰老体。数量越多，需要的灭菌时间越长。
②药物性质与灭菌时间：考虑药物的稳定性，应在达到有效灭菌的前提下适当降低灭菌温度或缩短灭菌时间。
③蒸汽的性质：饱和蒸汽热含量较高，热穿透力较强，灭菌效率高。热压灭菌应采用饱和蒸汽。
④介质的性质：制剂中含有营养物质(糖类、蛋白质)，能增强细菌的抗热性，细菌的生长和活力也受介质PH的影响。一般在中性环境耐热性最大，碱性环境次之，酸性环境不利于细菌的发育。
例：凡耐热产品热压灭菌所用的蒸汽是
A、115℃蒸汽
B、过饱和蒸汽
C、饱和蒸汽
D、过热蒸汽
E、流通蒸汽
答案：C
使用热压灭菌柜，应注意的事项：必须使用饱和蒸气;必须排尽灭菌柜内空气;灭菌时间应以全部药液温度达到所要求的温度时开始计时;灭菌完毕后必须先停止加热。
流通蒸气灭菌
指在常压下，采用100℃流通蒸汽加热杀灭微生物的方法。通常灭菌30～60分钟。此法不能保证杀灭所有的芽胞。适用于消毒及不耐高热制剂的灭菌。
煮沸灭菌法：是把安瓿或其他物品放入水中煮沸灭菌。通常煮沸30～60分钟，此法灭菌效果差。
流通蒸汽法和煮沸灭菌法的灭菌效果不如热压灭菌法可靠，不能保证杀灭所有的芽胞，但操作简便、使用安全。适用于一些不耐热且容量小的肌肉注射剂，还可以考虑加入抑菌剂。
例：煮沸灭菌法通常煮沸
A、80～100min
B、60～80 min
C、30～60 min
D、20～30 min
E、10～20 min
答案：C
低温间歇灭菌法
此法是将待灭菌的制剂或药品，用60-80℃水或流通蒸汽加热1小时，将其中的细菌繁殖体杀死，然后在室温或孵卵箱中放置24小时，让其中的芽胞发育成为繁殖体，再二次加热将其消灭为止。加热和放置需连续操作三次以上，至全部芽胞消灭为止。此法适用于必须用热法灭菌但又不耐较高温度的制剂或药品。本法的缺点，不仅需要时间长，并且消灭芽胞的效果常不够完全，应用本法灭菌的制剂或药品，除本身具有抑菌者外，须加适量抑菌剂，以增加灭菌效力。
